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用于耐抗生素细菌的荧光痕量传感和光动力破坏的纤维试纸
2020/3/10 9:15:25 admin

DOI: 10.1039/x0xx00000x

抗生素耐药菌的日益普遍需要快速识别和有效的销毁方法。本研究提出利用电纺纤维垫和聚集诱导发射(AIE)探针衍生的试纸,用于痕量感测并破坏抗药性大肠杆菌。将适体缀合在纤维上以选择性捕获大肠杆菌,并且可以通过用盐溶液冲洗来恢复捕获能力。羟基四苯乙烯(TPE)与两种头孢菌素分子连接构建TPE-Cep探针,在β-内酰胺酶存在下特异性地开启荧光发射,是筛选耐药菌的关键标记。纤维垫只有在抗生素耐药菌存在下才会发光,荧光强度的变化在统计学上可以拟合成定量分析方程。纤维条显示从蓝色到绿色的明显颜色变化,以便直观地读出细菌水平,并且检测限(LOD)远低于之前的纸张基底。此外,TPE-Cep探针可以在室内光照下产生活性氧(ROS)以杀灭捕获的细菌。因此,适体接枝电纺纤维与功能性AIE探针的结合为抗生素耐药菌的选择性捕获、痕量成像和光动力破坏提供了可能。

 

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图1.(a)TPE-Cep的合成路线。(b)TPE-GCLE和(c)TPE-Cep的1H NMR光谱。(d)TPE-GCLE在高达99%不同含水率的DMSO/水混合物中的荧光光谱。(e)在不同含水率的DMSO/水混合物中孵育后,TPE-GCLE在466 nm处的荧光强度变化(n=3)。


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图2.(a)TPE-Cep在PBS中和β-内酰胺酶存在下的荧光光谱。插图是使用手持式紫外线灯照明下溶液的照片。(b)在不同浓度的PCA和青霉素存在下,TPE-Cep与β-内酰胺酶孵育后的荧光强度(n=3)。(c)在β-内酰胺酶、BSA、胰蛋白酶、溶菌酶、酯酶、葡萄糖、CaCl2和CuSO4存在的情况下,TPE-Cep探针的荧光强度(n=3)。


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图3.(a)电纺PSMA/PS和Apt-g-PSMA/PS纤维的典型SEM图像和(b)XPS光谱。(c)具有不同PSMA组分的纤维表面的酸酐基团和适体的密度(n=3)。


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图4.(a)与105 CFU/mL大肠杆菌/pUC19孵育长达60分钟后的细菌捕获量(n=3)。(b)与105 CFU/mL大肠杆菌/pUC19孵育50分钟后,不同PSMA组分的纤维对细菌的捕获量(n=3)。(c)细菌捕获的纤维毡的典型SEM形态。箭头指示捕获的细菌。(d)与105 CFU/mL大肠杆菌/pUC19、大肠杆菌、表皮葡萄球菌和铜绿假单胞菌孵育50分钟后的细菌捕获量(n=3)。


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图5.(a)与TPE-Cep探针孵育后,在纤维上捕获的大肠杆菌/pUC19、大肠杆菌、表皮葡萄球菌和铜绿假单胞菌的荧光强度(n=3)。(b)在不存在和存在青霉素(n=3)的情况下,与TPE-Cep探针孵育后捕获的大肠杆菌/pUC19和大肠杆菌的荧光强度(104和105 CFU/mL)。(c)与不同浓度的大肠杆菌/pUC19孵育后,再用TPE-Cep探针(n=3)处理后,纤维毡的荧光光谱和强度(d)。(e)在手持紫外线灯的照射下,在365 nm处以不同浓度大肠杆菌/ pUC19存在的纤维毡色带。(f)经不同周期TPE-CEP处理后,纤维上捕获的细菌荧光强度(n=3)。


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图6.(a)在捕获的大肠杆菌/pUC19、TPE-Cep探针以及混合物存在的情况下,DCFH-DA在黑暗和光照下的荧光光谱。(b)在捕获的细菌、TPE-Cep探针以及混合物存在的情况下,DCFH-DA在黑暗和室温下与104和105 CFU/mL的大肠杆菌/pUC19孵育后的荧光强度(n=3) 。(c)捕获的大肠杆菌/pUC19在黑暗中和(d)在光照射下与TPE-Cep探针孵育后的SEM图像。


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