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东华大学莫秀梅Colloids Surf. B Biointerfaces:PLCL/丝素蛋白基纳米抗菌敷料的制备、表征及生物学评估
2020/9/4 17:24:54 admin

DOI:10.1016/j.colsurfb.2020.111352

与合成的化学药品相比,天然生物相容性药物在伤口敷料中的应用是非常可取的。牛至精油(OEO)是一种很有前途的天然化合物,具有显著的抗菌、抗氧化和消炎活性。OEO的局部递送可能会导致较差的治疗功效和对皮肤的刺激性。此外,OEO是一种易挥发的化合物,这会导致不稳定性。为克服这些缺点,研究者成功地将OEO封装在聚(L-丙交酯-己内酯)(PLCL)/丝素蛋白(SF)纳米纤维膜(NF)中,包封率高达59.14±0.58%。对所制备的膜进行了理化和生物学评估。SEM表征表明,成功地封装OEO可以保持纳米纤维的光滑轮廓。通过细胞毒性试验证实了NF膜的生物相容性。抗菌结果表明,含有OEO的纳米纤维膜对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌均具有很高的抗菌活性。结果表明,5%是完全抑制细菌生长的最佳OEO浓度。此外,还评估了NF膜的体内伤口愈合潜力。结果表明,含OEO的NF膜不仅能够加速伤口收缩,而且还提高了伤口愈合的质量,这一点通过组织学分析得到了证实。H&E和Masson三色染色表明,在用PLCL/SF/5%OEO处理的组中存在新上皮化、肉芽组织形成、血管生成和胶原蛋白沉积。基于理化和生物学评估,PLCL/SF/5%OEO NF膜可被视为一种潜在的伤口敷料。

 

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图1.(A)PLCL/SF,(B)PLCL/SF/2.5%OEO和(C)PLCL/SF/5%OEO的SEM图像,以及分别显示形态和纤维分布的直方图(比例尺=20µm)。


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图2.OEO、PLCL和SF之间的交互机制示意图。


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图3.PLCL/SF、PLCL/SF/2.5%OEO和PLCL/SF/5%OEO的X射线衍射。


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图4.PLCL/SF/2.5%OEO和PLCL/SF/5%OEO的封装效率(%)和负载容量(%)。


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图5.抗粘连性结果,(A)抗粘连性试验的CCK8结果,(B)第4天后在NF膜上生长的细胞的SEM图像(比例尺=80µm):(B1)PLCL/SF,(B2)PLCL/SF/2.5%OEO,(B3)PLCL/SF/5%OEO。(C)细胞毒性的CCK8结果和(D)在条件培养基中生长的细胞的显微照片(比例尺=50µm):(B1)PLCL/SF,(B2)PLCL/SF/2.5%OEO,(B3)PLCL/SF/5%OEO。


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图6.(W)抗菌活性(%),(X)金黄色葡萄球菌(上部)和大肠杆菌(下部)与不同培养物的图像:(XA)空白培养基,(XB)阴性对照,(XC)PLCL/SF处理,(XD)PLCL/SF/2.5%OEO处理的培养物和(XE)PLCL/SF/5%OEO处理的培养物。(Y)金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制区域,(Z)代表性的SEM图像显示细菌在PLCL/SF、PLCL/SF/2.5%OEO和PLCL/SF/5%OEO上的生长情况。(比例尺=10µm)


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图7.(A)在第0、5和10天拍摄的皮肤伤口图像,(B)显示第0、5和10天伤口收缩率(%)的图表。


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图8.(A)未经处理的、用PLCL/SF和PLCL/SF/5%OEO处理的皮肤伤口样本的H&E染色。上皮组织、不连续上皮层、连续上皮层、胶原纤维、角质层、基底层、毛囊和毛细血管的厚度分别用黄色双箭头、黑色虚线、黑色直线、黑色箭头、深绿色箭头、浅绿色箭头、橙色箭头和黄色箭头表示。(B)Masson三色染色显示未经处理以及用PLCL/SF NF和PLCL/SF/5%OEO NF膜处理的伤口组织在第5天和第10天的胶原纤维数量和沉积。


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