DOI: 10.1002/mabi.202000361

目前为止，尽管在慢性伤口治疗方面取得了一些进展，但高效的抗菌皮肤支架材料仍然是该领域的研究热点。本研究制备了一种掺杂天然药物地衣酸（UA）的功能化丝素蛋白（SF）皮肤支架，其中以UA为抗菌及伤口愈合剂。通过静电纺丝，将UA-SF混合物制成UA-SF复合支架（USCS），该支架由平均直径约为360±10nm的均匀纳米纤维组成。交织的纳米纤维形成网状结构，从而为支架提供足够的透湿性。通过甲醇处理，USCS具有改善的力学性能和对蛋白酶XIV的稳定性。当存在USCS时，在平板培养和悬浮液检测中，革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌（包括金黄色葡萄球菌，化脓性链球菌，大肠杆菌和铜绿假单胞菌）的生长速率均受到显著抑制。在小鼠皮肤切除伤口模型中，与纯SF支架和市售敷料（3M Tegaderm Hydrocolloid）相比，USCS的伤口闭合率显著提高。经组织学评估进一步证实，USCS可促进伤口的再上皮化、血管化和胶原蛋白沉积，从而加快伤口愈合过程，这表明USCS在慢性伤口治疗中具有广阔的应用前景。

图1.USCS的SEM表征。a-c）分别在4、10和20k的不同放大倍率下浓度为18wt％的纯SF支架。d）在10k的放大倍率下，USCS的UA负载为0.5％。e-g）分别在4、10和20k的不同放大倍率下，浓度为20wt％的纯SF支架。h）在10k的放大倍率下，USCS的UA负载为0.5％。

图2.a）支架经甲醇处理之前和之后的FTIR分析，以及酰胺I区在1750和1580 cm-1之间的原始FTIR吸收光谱，酰胺I区中不同SF构象的形态分布。b）甲醇处理前后SF中不同构象的含量。c）甲醇处理前从傅里叶自解卷积到原始光谱的曲线拟合（蓝/黑/红/绿线表示基线/减去的数据（原始峰减去基线）/拟合曲线/隐藏峰）。d）甲醇处理后从傅里叶自解卷积到原始光谱的曲线拟合（蓝/黑/红/绿线表示基线/减去的数据（原始峰减去基线）/拟合曲线/隐藏峰）。

图3.a）在拉伸试验中获得的USCS的应力-应变曲线。与18wt％SF浓度（黑色曲线）相比，20wt％SF浓度下的USCS（绿色曲线）具有更高的柔性。甲醇处理略微提高了18wt％（红色曲线）和20wt％（蓝色曲线）SF浓度USCS的柔性。b）用甲醇处理之前和之后，18wt％SF支架UTS的变化。c）用甲醇处理之前和之后，20wt％SF支架UTS的变化。d）用甲醇处理之前（红线）和之后（蓝线），含18wt％SF的USCS在蛋白酶XIV中的降解率。e）用甲醇处理之前（红线）和之后（蓝线），含20wt％SF的USCS在蛋白酶XIV中的降解率；黑色线代表用PBS处理的USCS的重量变化。f）随着时间的推移，USCS和3M Tegaderm Hydrocolloid的WVTR。g）甲醇处理之前和之后，USCS中UA的缓释。

图4.a）含和不含UA的支架的抗菌活性。比例尺：10mm。b-e）具有不同UA浓度的支架的抗菌指数。f-i）四种细菌的生长曲线。j-m）在24h内与支架共培养的细菌浓度。

图5.a-e）在USCS提取培养基中培养24h后，用显微镜观察的细胞形态。比例尺：400µm。f）CCK-8细胞活性测试。g-j）附着于USCS的细胞的SEM图像。

图6.a）第0、3、7和12天伤口的愈合程度。b）小鼠的平均伤口闭合率。比例尺：10mm。

图7.伤口的苏木精和伊红染色图像。a-c）黑色对照。d-f）用纯SF支架覆盖。g-i）用3M Tegaderm Hydrocolloid覆盖。j-l）USCS治疗。红色箭头指向穿孔部位。橙色箭头：表皮层；蓝色箭头：炎性细胞浸润；紫色箭头：嫩肤恢复；绿色箭头：新的肉芽组织；黑色箭头：新血管形成。比例尺：200µm。

图8.a）伤口的Masson三色染色图像。a-c）黑色对照。d-f）用纯SF支架覆盖。g-i）用3M Tegaderm Hydrocolloid覆盖。j-l）USCS治疗。黑色箭头指向穿孔部位。蓝色代表胶原蛋白染色。比例尺：200µm。

图9.a）伤口的VEGF免疫组织化学染色图像。a-c）黑色对照。d-f）用纯SF支架覆盖。g-i）用3M Tegaderm Hydrocolloid覆盖。j-l）USCS治疗。棕色部分代表间歇性VEGF表达。比例尺：200µm。

图10.a）伤口的CK10免疫组织化学染色图像。a-c）黑色对照。d-f）用纯SF支架覆盖。g-i）用3M Tegaderm Hydrocolloid覆盖。j-l）USCS治疗。蓝色箭头代表间歇性CK10表达；黑色箭头指向整合表皮层中CK10连续表达的位点。比例尺：200µm。